Trans RNA 轉染試劑

制膠 蛋白質(zhì)生物學(xué) 試劑

• 價(jià)格￥980
• 規格0.5ml
• 貨號HKR062
• 單位支
• 品牌HaoKebio

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【產(chǎn)品信息】

【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

Trans RNA 轉染試劑（下文簡(jiǎn)稱(chēng)“Trans ”）采用新型脂質(zhì)體納米材料，可用來(lái)轉染 siRNA、miRNA 等 150bp 以?xún)鹊男》肿?RNA 和 DNA，轉染細胞包括絕大多數貼壁生長(cháng)的細胞，如一般細胞株、腫瘤細胞株等。

本產(chǎn)品是一類(lèi)快捷高效即用型試劑溶液，僅需在 EP 管中將細胞培液與 siRNA 或 miRNA等轉染目的小 RNA 同轉染試劑混合，室溫孵育約 2 min 后加入完全細胞培養液中即可，血清對轉染效果沒(méi)有影響，實(shí)驗過(guò)程無(wú)需刻意添加或更換培養液。??

【儲存與運輸】

藍冰運輸， 4℃保存，有效期一年。

【使用方法】

使用方法（以 24 孔板為例，其他培養皿中轉染請參考表 1）

1．接種細胞

對于貼壁細胞，轉染前 18-24 h 進(jìn)行鋪板，本轉染試劑要求細胞鋪板密度不高，建議 70%-90%為佳。

【注】：培養液中的血清不影響轉染效率。轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響，建議初次使用時(shí)設置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。

2．準備 Trans-轉染目的小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)復合物

(1) 對于每孔細胞， 將 20 pmol 待轉染目的小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)稀釋到 50 μL 基礎培養基或完全培養基中（無(wú)需額外的 Opti-MEM 培養基），混勻。

(2) 對于每孔細胞，將 1.25-2.5 μL（視細胞類(lèi)型調整） Trans 轉染試劑添加到上述步驟（1）中的混合培液中，輕輕混勻。

(3) 室溫孵育約 2 min。

3．轉染細胞

(1) 將上述孵育完成的轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動(dòng)培養皿或輕微振蕩，讓轉染復合物分散均勻。

(2) 在 37℃，5% CO2 培養箱培養 24-48 h，無(wú)需更換新的培養液，之后即可對轉入基因表達分析。

【注意事項】

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2. 小 RNA(siRNA 或 miRNA 等)質(zhì)量：請務(wù)必使用高純度無(wú)內毒素轉染級 RNA。

3. 細胞條件：使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保細胞沒(méi)有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。

4. 細胞培養液要求： Trans 細胞轉染試劑可用于有血清培養基的轉染，并且轉染前后不需要換培養基。

確保細胞培養液沒(méi)有被細菌、真菌或支原體污染。

5. 試劑用量的優(yōu)化：RNA 濃度和轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響，初次使用應優(yōu)化 RNA 濃 度和轉染試劑量以得到最大的轉染效率。使用者可嘗試每 20 pmol RNA 使用 1～4 μL 體積 Trans 細胞轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。

表 1：不同培養體積對應的待轉 RNA、 Trans、稀釋液用量