產(chǎn)品目錄 | 主要成分 | 產(chǎn)品規格 |
試劑 A | 草酸銨結晶紫染色液 | 20ml |
試劑 B | 1%碘溶液 | 20ml |
試劑 C | 脫色液 | 20ml |
試劑 D | 復紅染色液 | 20ml |
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
革蘭氏染色法是微生物學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,可用來(lái)區分革蘭氏陽(yáng)性菌 (G+) 和革蘭氏陰性菌 (G-) ,基本原理是基于細菌細胞壁化學(xué)組分不同。細菌經(jīng)結晶紫 初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成不溶于水的結晶紫-碘復合物。革蘭氏陽(yáng)性細菌由于 細胞壁較厚,不含類(lèi)脂,富含肽聚糖并交聯(lián)形成致密網(wǎng)格結構,在用乙醇處理時(shí)肽聚糖網(wǎng) 孔收縮,能將結晶紫-碘復合物阻留在細胞壁內,使其呈現結晶紫的紫色。而革蘭氏陰性 細菌因其細胞壁薄,肽聚糖含量低且交聯(lián)松散。遇乙醇時(shí)富含類(lèi)脂的外膜溶解,在細胞壁 上出現較大縫隙,結晶紫-碘復合物流出,因此經(jīng)乙醇脫色后細胞又成無(wú)色。此時(shí)再經(jīng)番 紅復染,革蘭氏陰性細菌將被染成紅色。
本產(chǎn)品革蘭氏染色液,包含四個(gè)組分,分別是草酸銨結晶紫染色液,1%碘溶液,脫色 液和復紅染色液。經(jīng)染色后,革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色至藍紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。
【儲存與運輸】
常溫保存與運輸;有效期 12 個(gè)月。
【使用方法】
1. 石蠟切片脫蠟至水;細菌涂片自然干燥或酒精燈略加溫干燥固定。
2. 初染:滴加結晶紫染色液覆蓋樣本染色 10-30 s,水洗,甩干水分。
3. 媒染:滴加 1%碘溶液覆蓋樣本染色 1-1.5 min,水洗,甩干水分。
4. 脫色:滴加脫色液從載玻片一端沖洗組織進(jìn)行脫色,直至流下的脫色液不再出現紫色 為止,立即水洗去除脫色液。注意控制脫色時(shí)間。
5. 復染:滴加復紅染色液染色 20-60 s,水洗。用濾紙吸干邊緣水分。
6. 細菌涂片可直接鏡檢觀(guān)察。組織切片經(jīng) 60℃烤干后,經(jīng)無(wú)水乙醇快速脫水三次,分別
1 s、3 s、5 s。然后經(jīng)二甲苯透明 5 min,最后以中性樹(shù)膠封片,鏡檢。
【注意事項】
1. 試劑使用完后及時(shí)擰緊瓶蓋,防止溶劑揮發(fā)。
2. 細菌涂片過(guò)厚、結晶紫染色時(shí)間過(guò)長(cháng)、脫色不足等可能導致假陽(yáng)性結果;細菌涂片 熱固定過(guò)度、脫色過(guò)度可能導致假陰性結果。建議同時(shí)做陰性菌和陽(yáng)性菌對照組。
3. 操作時(shí)請穿實(shí)驗服,并佩戴一次性手套。
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