• 細胞培養

    細胞培養

    • 價(jià)格￥2000
    • 單位批
    • 貨號HKF6001
    • 品牌浩克

    產(chǎn)品介紹
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    服務(wù)介紹：

    貨號名稱(chēng)規格價(jià)格
    HKF6001細胞培養批2000元
    　簡(jiǎn)介：
    　　細胞培養是采用無(wú)菌操作的方法，模擬動(dòng)物體內的生理條件，在體外進(jìn)行培養.使其不斷地生長(cháng)、繁殖，從而觀(guān)察細胞的增殖、分化以及細胞衰老等過(guò)程的生命現象。常見(jiàn)的細胞培養方式可分為貼壁和懸浮兩種。細胞培養的常規操作包括：
    1)細胞的接種和傳代
    2)細胞計數
    3)細胞的復蘇和凍存。
    細胞培養方法：
    　　1、完全培養基配置：培養基的配制(需在超凈臺內無(wú)菌操作)：10%FBS+90%培養基(根據細胞的種類(lèi)分為DMEM/F12、DMEM/HIGH、
    MEM/EBSS、改良型RPMI-1640培養基)。
    　　2、細胞復蘇：
    a. 把凍存管從液氮中取出來(lái)，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動(dòng)。液體都融化后(大概1-1.5分鐘)，拿出來(lái)噴點(diǎn)酒精放到超凈工作臺里。
    b.把上述細胞懸液吸到裝10ml培養基15ml的離心管中(用培養基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來(lái))，1000轉離心5分鐘。
    c.把上清液倒掉，加1ml培養基把細胞懸浮起來(lái)。吸到裝有10ml培養基的培養瓶中前后左右輕輕搖動(dòng)，使培養瓶中的細胞均勻分布。
    d.標好細胞種類(lèi)和日期等，放到CO2培養箱中培養，細胞貼壁后換培養基。
    e. 3天換一次培養基。
    　　3、細胞傳代：
    a. 培養瓶中的細胞覆蓋率達到80%-90%時(shí)要傳代。
    b.把原有培養基吸掉。
    c.加適當的胰蛋白酶(能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。
    d.細胞都變圓后吸出胰酶 終止消化。
    e.加入20ml的完全培養基，移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來(lái)。
    f.根據細胞種類(lèi)把細胞傳到幾個(gè)培養瓶中。一般，癌細胞分4個(gè)，正常細胞傳3個(gè)。繼續培養。
    　　4、細胞凍存：
    把細胞消化下來(lái)并離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來(lái)，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫(xiě)明細胞種類(lèi)，凍存日期。
    4℃30min，-20℃30min，-80℃過(guò)夜，然后放到液氮罐中保存。
    凍存液的配制：70%的完全培養基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

    樣本寄送須知：

    　　1.活細胞：一定要不透氣方瓶寄，常溫;

    　　2.凍存細胞：純干冰件，保證干冰充足

    無(wú)

    暫無(wú)

    說(shuō)明文檔下載

    　常用的細胞培養基：

    名稱(chēng)成份適用細胞類(lèi)型備注
    MEMBSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素各種傳代細胞系和原代細胞在此基礎上改良的培養基有BEM、DMEM
    DMEM改良自MME，各成分量加倍貼附型腫瘤細胞，CHO細胞分低糖（5.5mM）、高糖（25mM）型，高糖型較常用
    RPMI-1640BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等懸浮細胞，正常細胞，腫瘤細胞最初針對淋巴細胞設計
    L15半乳糖替代了葡萄糖;磷酸鹽緩沖體系快速增殖瘤細胞，CO2缺乏以半乳糖代替了葡萄糖
    McCoy5ABSS＋40種成分原代細胞，淋巴細胞，組織活檢細胞最初為肉瘤細胞設計
    DMEM/F12高濃度與成分多樣化原代培養及更難養的細胞系F12與DMEM等體積混合，可作為開(kāi)發(fā)無(wú)血清培養基的基礎配方
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