項目介紹

原位雜交技術(shù)(In situ hybridization，ISH)是利用核酸分子互補配對使雜交探針可以特異性結合于組織或細胞中目標核酸分子，再通過(guò)探針帶有的地高辛或者熒光標記物，特異性鑒定、檢測目標核酸分子的相對含量以及在組織細胞中的定位。因此原位雜交可以在組織或細胞原有結構基礎之上(組織切片或細胞)，檢測某種基因的有無(wú)，定位及半定量。熒光標記探針進(jìn)行原位雜交即為FISH(Fluorescence in situ hybridization)，可以替代放射標記物，靈敏度高、實(shí)驗效率高。

應用

原位雜交可以定性檢測組織細胞中的mRNA、lncRNA、circRNA，也可以定位及分析染色質(zhì)中的基因。利用特異性16s RNA探針還可以簡(jiǎn)單樣品中的細菌、古細菌，還可以通過(guò)特意探針鑒定組織細胞中的病毒。FISH能夠用來(lái)檢測或確認基因或染色體是否異常，醫學(xué)和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測非整倍體、基因重排、拷貝數變異等。

樣本保存運輸

組織冰凍切片

組織切取需要部位，厚度在2mm 左右, PBS 漂洗，干冰運輸或立即置于固定液中。組織固定有原位雜交固定液(動(dòng)物)、原位雜交固定液(植物)、原位雜交固定液(較嫩植物)，室溫固定12 小時(shí)(根據組織大小)以上，植物組織固定時(shí)需常溫抽真空30min，再用純水或PBS 清洗兩次后， 放入15% 蔗糖溶液中，4℃脫水8 小后，換30% 蔗糖溶液4℃過(guò)夜。冰切時(shí)佩戴手套。冰凍切片放-20℃或-80℃ 保存備用。

組織石蠟切片

組織切取需要部位，厚度在2mm 左右, PBS 漂洗后立即固定。動(dòng)物組織用原位雜交固定液(動(dòng)物)，植物組織用原位雜交固定液(植物)或原位雜交固定液(較嫩植物)，植物組織固定時(shí)需常溫抽真空30min，固定12h 以上。固定完成后脫水、包埋、切片。梯度酒精配制需用DEPC 水。石蠟常規保存備用。

標本運輸

冰凍切片：標本放原位雜交固定液中，常溫運輸;冰凍切片-20℃運輸;新鮮組織干冰運輸。交接單隨樣本一起，單獨封裝。

石蠟切片：標本放原位雜交固定液中，常溫運輸;石蠟切片常溫運輸。交接單隨樣本一起，單獨封裝。

細胞爬片：細胞爬片加原位雜交固定液后密封4℃運輸。交接單隨樣本一起，單獨封裝。

DEPC 水配制

純水中加入0.1%DEPC 原液震蕩攪拌2h 后靜置過(guò)夜后高壓滅菌，有效滅菌時(shí)間30min 以上，或直接購買(mǎi)。

結果展示

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　　價(jià)格列表

• 服務(wù)項目	價(jià)格
  Tunel（白光）檢測	200元/張
  Tunel（熒光）檢測	200元/張
  IF Tunel 雙染	250元/張
  Tunel( 芯片）	550元/張
  原位雜交（DAB 顯色）	240元/張
  原位雜交（FISH 單標）	240元/張
  原位雜交（FISH、IF 雙染）	300元/張
  原位雜交（FISH 雙標）	300元/張
  原位雜交（FISH 三標）	350元/張
  原位雜交（芯片）	500 元起
  探針設計合成（一端標記、BIO）	600元/條
  探針設計合成（一端標記、DIG）	1000 元 / 條
  探針設計合成（一端標記、FAM）	1100 元 / 條
  探針設計合成（一端標記、Cy3）	1900 元 / 條
  探針設計合成（兩端標記、BIO）	1200 元 / 條
  探針設計合成（兩端標記、DIG）	1690 元 / 條
  探針設計合成（兩端標記、FAM）	1400 元 / 條
  探針設計合成（兩端標記、Cy3）	2500 元 / 條