• HaoKebio? Rapid RNA FISHKit(Plant)

    HaoKebio? Rapid RNA FISHKit(Plant)

    • 價(jià)格¥3000
    • 規格30T
    • 貨號HKR11Z
    • 單位
    • 品牌HaoKebio
    產(chǎn)品介紹

    【產(chǎn)品信息】

    產(chǎn)品名稱(chēng)產(chǎn)品貨號30T保存有效期
    洗液*2(粉末溶解于5L ddH2O)HKR12-15L*2短期4℃長(cháng)期-20℃12個(gè)月
    蛋白酶 K(100x)HKR12-230uL
    AP-鼠抗地高辛(100x)HKR12-330uL
    NBT顯色液A(20x)HKR12-4A150uL
    NBT顯色液B(20x)HKR12-4B150uL
    封閉液HKR12-53mL
    探針HKR11-63mL

    【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

    RNA快速雜交試劑盒,適用于大于300bp的rna原位雜交,該試劑盒具有簡(jiǎn)易快速的操作流程,能顯著(zhù)縮短實(shí)驗時(shí)間。其特色在于采用多組觸發(fā)探針。當探針與靶序列結合后,會(huì )暴露擴增序列從而引發(fā)樹(shù)枝狀雜交鏈式反應(HCR),形成巨大的核酸聚合物。每條核酸鏈均標記有地高辛(DIG),可通過(guò)抗體檢測實(shí)現顯色可視化。

    組織固定

    組織類(lèi)型動(dòng)物組織植物組織冰凍樣本細胞爬片細胞
    處理方式室溫固定12h,石蠟包埋。抽真空固定1h,室溫固定12h,石蠟包埋。15%蔗糖溶液中,4℃脫水8小時(shí),換30%蔗糖溶,液4℃脫水8小時(shí),OCT包埋。 4°固定2h左右。貼壁細胞用PBS清洗,加入多聚甲醛,將細胞刮下來(lái),收集到離心管中,4℃固定2h,PBS清洗,瓊脂糖包埋。
    種類(lèi)mRNAlncRNAcircRNAmiRNArRNA
    處理方式室溫固定12h室溫固定12h(小于300bp固定24h)室溫固定12h室溫固定12h室溫固定12h(小于300bp固定24h)

    【儲存與運輸】

    冰袋(wet ice)運輸;-20℃長(cháng)期保存,短期于4℃保存,有效期6個(gè)月。

    【使用方法】

    1. 脫蠟至水

    依次將切片放入二甲苯Ⅰ15 min-二甲苯Ⅱ15 min-二甲苯Ⅲ15 min-無(wú)水乙醇10 min-90%酒精10 min-80%酒精10 min -70%酒精10 min -純水沖洗。

    2. 修復

    細胞樣本:等待切片完全干燥后,用組畫(huà)筆(推薦HKR14P原位雜交專(zhuān)用組畫(huà)筆)畫(huà)出大小合適的疏水圈,在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片。將100ul蛋白酶K修復液(1X)滴于組織上,37℃孵育10min,純水沖洗終止反應。

    冰凍切片:細胞樣本:等待切片完全干燥后,用組畫(huà)筆(推薦HKR14P原位雜交專(zhuān)用組畫(huà)筆)畫(huà)出大小合適的疏水圈,在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片。將100ul蛋白酶K修復液(1X)滴于組織上,37℃孵育20min(冰凍切片),純水沖洗終止反應。

    石蠟切片:將裝入玻片的玻片架放入修復槽,倒入1x檸檬酸6.0修復液(樣本區域須被浸沒(méi)),蓋上蓋子,用膠帶紙封住,放入微波爐中,中火8min,停8min,中低火8min。自然冷卻降溫后,用3%雙氧水封閉15min。

    3. 封閉

    取出切片,甩干切片上的液體,用組畫(huà)筆(推薦HKR14P原位雜交專(zhuān)用組畫(huà)筆)畫(huà)出大小合適的疏水圈,在原位雜交儀中或濕盒中水平放置切片,每張切片滴加100ul封閉液,37℃孵育30min,洗滌1次,每次5min。洗滌步驟:將裝入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(樣本區域須被浸沒(méi)),置于搖床上5min,轉速為60。

    4. 探針雜交

    甩干切片上的液體,每張切片滴加100ul的探針,37℃孵育2h-3h,注意保持濕度以防干片。洗滌5次,每次5min。洗滌步驟:將裝入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(樣本區域須被浸沒(méi)),置于搖床上5min,轉速為60。

    5. AP-鼠抗地高辛

    甩干切片上的液體,每張切片滴加100ul的AP-鼠抗地高辛(1x),37℃濕盒孵育40min;洗滌5次,每次5min。洗滌步驟:將裝入玻片的玻片架放入洗液缸,倒入洗液(樣本區域須被浸沒(méi)),置于搖床上5min,轉速為60。

    6. 顯色

    每張切片滴加100ul的顯色液(1mL去離子水加50ul顯色液A和50ul顯色液B),室溫孵育30min。純水沖洗,終止反應。自然風(fēng)干后,滴加封片劑封片。

    【注意事項】

    為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

    本產(chǎn)品僅作科研用途。

    【說(shuō)明書(shū)下載】

    For research use only.

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