• 革蘭氏染色
    革蘭氏染色
    革蘭氏染色

    革蘭氏染色

    • 價(jià)格¥25
    • 單位
    • 貨號HKF3029
    • 品牌浩克

    產(chǎn)品介紹
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    【產(chǎn)品信息】

    產(chǎn)品名稱(chēng)產(chǎn)品貨號規格價(jià)格
    革蘭氏染色HKF302925元
    一、 實(shí)驗原理
    革蘭氏染色法是微生物學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,可用來(lái)區分革蘭氏陽(yáng)性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-),基本原理是基于細菌細胞壁化學(xué)組分不同。細菌經(jīng)結晶紫初染和碘液媒染后,在細胞壁內形成不溶于水的結晶紫-碘復合物。革蘭氏陽(yáng)性細菌由于細胞壁較厚,不含類(lèi)脂,富含肽聚糖并交聯(lián)形成致密網(wǎng)格結構,在用乙醇處理時(shí)肽聚糖網(wǎng)孔收縮,能將結晶紫-碘復合物阻留在細胞壁內,使其呈現結晶紫的紫色。而革蘭氏陰性細菌因其細胞壁薄,肽聚糖含量低且交聯(lián)松散。遇乙醇時(shí)富含類(lèi)脂的外膜溶解,在細胞壁上出現較大縫隙,結晶紫-碘復合物流出,因此經(jīng)乙醇脫色后細胞又成無(wú)色。此時(shí)再經(jīng)番紅復染,革蘭氏陰性細菌將被染成紅色。
    • 實(shí)驗步驟

    1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來(lái)水洗。

    2、革蘭氏染色:切片滴加革蘭氏染液A滴染10s-30s,水洗,甩干;滴加革蘭氏染液B1min,水洗,甩干;巴氏吸管吸取革蘭氏染液C從載玻片磨砂面一端沖洗組織進(jìn)行分化,至切片流下的革蘭氏染液C呈無(wú)色即可,水洗,甩干;將切片浸革蘭氏染液D溶液1s水洗,鏡檢,烤箱烤干。

    3、脫水:將烤干的切片快速入三缸無(wú)水乙醇快速脫水,依次1s、3s、5s。

    4、透明封片:切片放入干凈的二甲苯5min透明,中性樹(shù)膠封片。

    5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

    • 結果判讀:

    革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。

    注意事項:

    1、染色過(guò)程中的革蘭氏染液C分化是關(guān)鍵步驟,需注意分化程度。

    2、盡量不要重復染色,分化液在脫去片子顏色的同時(shí)也改變了細胞壁的通透性,影響了最后結果的準確性。

    3、冬季氣溫較低時(shí),染色時(shí)間可適當延長(cháng)。

    無(wú)

    暫無(wú)

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