免疫組化 分子病理 實(shí)驗服務(wù) 免疫組化雙染免疫組化 分子病理 實(shí)驗服務(wù) 價(jià)格¥100單位張貨號HKF2003品牌浩克 QQ53383090 咨詢(xún)購買(mǎi) 產(chǎn)品介紹產(chǎn)品參數資料下載 【產(chǎn)品信息】 產(chǎn)品名稱(chēng)產(chǎn)品貨號規格價(jià)格免疫組化雙染HKF2003張100元 實(shí)驗原理 免疫組化,是應用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過(guò)化學(xué)反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱(chēng)為免疫組織化學(xué)技術(shù)(IHC)或免疫細胞化學(xué)技術(shù)(ICC)。 實(shí)驗器材及試劑 1.主要實(shí)驗器材 名稱(chēng)廠(chǎng)家名稱(chēng)儀器編號脫水機湖北貝諾醫療科技有限公司JT-12S生物組織自動(dòng)包埋機湖北貝諾醫療科技有限公司JB-L5石蠟包埋機(冷臺)湖北貝諾醫療科技有限公司JB-L5轉輪式切片機徠卡顯微系統上海有限公司RM2016KD-P組織攤片機浙江金華科迪儀器設備有限公司Z51A011烤箱天津市萊玻特瑞儀器設備有限公司GFL125微波爐美的M1-L213B載玻片及蓋玻片江蘇匯達醫療器械有限公司710510 脫色搖床上海琪特分析儀器有限公司STS-3渦旋儀秒生科技有限公司SI-A256 掌上離心機上海吉泰生物科技有限公司MC2顯微鏡NIKONECLIPSE E100組化筆Gene techGT1001移液槍DragonKE003068 2.主要實(shí)驗試劑 試劑名稱(chēng)廠(chǎng)家名稱(chēng)貨號無(wú)水乙醇杭州宏達化工儀器有限公司SJ003614二甲苯國藥集團化學(xué)試劑有限公司10023418PBS緩沖液杭州浩克生物技術(shù)有限公司 抗原修復液EDTA(9.0)杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0004BSA杭州浩克生物技術(shù)有限公司HK5021組化試劑盒圖凌杭州生物醫藥有限公司I20012C一抗:xxx紅+xxx棕 二抗:超敏兔鼠通用二抗杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0029組化紅色顯色試劑盒杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0007蘇木素染液杭州浩克生物技術(shù)有限公司HK5023鹽酸分化液杭州浩克生物技術(shù)有限公司HK5024 氨水水溶液返藍液杭州浩克生物技術(shù)有限公司HK5025 中性樹(shù)膠國藥集團化學(xué)劑有限公司10004160 實(shí)驗步驟 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min -無(wú)水乙醇Ⅰ6min- 95%酒精6min- 85%酒精6min,自來(lái)水洗2min。 抗原修復:組織切片置于盛滿(mǎn)抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內進(jìn)行抗原修復,中火8min至沸騰?;?min再轉中低火7min,此過(guò)程中應防止緩沖液過(guò)度蒸發(fā),切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。 阻斷內源性過(guò)氧化物酶:切片加上3%的雙氧水,室溫孵育25min,將玻片置PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。 畫(huà)圈:用組化專(zhuān)用的組化筆沿著(zhù)組織外圍輪廓畫(huà)一個(gè)與組織間隔3-4毫米的小圈,然后加入足量的PBS保證后續依次加入的封閉血清,一抗,二抗,以及顯色劑能完全覆蓋組織,而不沿著(zhù)玻片流走。 血清封閉:在組化圈內滴加3%BSA 均勻覆蓋組織,室溫封閉30min。 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒4°過(guò)夜孵育。 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與超敏兔鼠通用二抗(HRP標記)覆蓋組織,室溫孵育50min。 顯色:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加解凍的TY反應液反應20min,然后PBS洗三次,之后加入紅色顯色液工作液(PB:CU:紅色色原:AC=860:40:1:100),顯微鏡下控制顯色時(shí)間,陽(yáng)性為紅色,純水沖洗切片終止顯色。(時(shí)間較長(cháng)15min左右),再重復2-7的操作步驟。 抗原修復:組織切片置于盛滿(mǎn)抗原修復液EDTA(9.0)的修復盒中于微波爐內進(jìn)行抗原修復,中火8min至沸騰?;?min再轉中低火7min,此過(guò)程中應防止緩沖液過(guò)度蒸發(fā),切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。 阻斷內源性過(guò)氧化物酶:切片加上3%的雙氧水,室溫孵育25min,將玻片置PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。 畫(huà)圈:用組化專(zhuān)用的組化筆沿著(zhù)組織外圍輪廓畫(huà)一個(gè)與組織間隔3-4毫米的小圈,然后加入足量的PBS保證后續依次加入的封閉血清,一抗,二抗,以及顯色劑能完全覆蓋組織,而不沿著(zhù)玻片流走。 血清封閉:在組化圈內滴加3%BSA 均勻覆蓋組織,室溫封閉30min。 加一抗:輕輕甩掉封閉液,在切片上滴加按一定比例配好的一抗,切片平放于濕盒4°過(guò)夜孵育。 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加與超敏兔鼠通用二抗(HRP標記)覆蓋組織,室溫孵育50min。 DAB顯色:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內滴加(稀釋液和濃縮液1000:50配制)新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下控制顯色時(shí)間,陽(yáng)性為棕黃色,純水沖洗切片終止顯色。 復染細胞核:蘇木素染色2-3mins左右,自來(lái)水洗,蘇木素分化液分化2秒,自來(lái)水沖洗,蘇木素返藍液返藍15-30s,流水沖洗。 脫水封片:將切片依次放入75%酒精5min-85%酒精5min -95%酒精5min -無(wú)水乙醇5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min 中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來(lái)稍晾干,中性樹(shù)膠封片。 顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。 結果判讀: 蘇木素染出細胞核為藍色,DAB顯出的陽(yáng)性表達為棕黃色,紅色顯色試劑呈粉紅色 注意事項: 1. 注意切片脫蠟是否徹底; 2. 實(shí)驗過(guò)程中切片勿干片; 3. 實(shí)驗操作中小心槍頭掛傷組織。 2. 實(shí)驗過(guò)程中切片勿干片; 3. 實(shí)驗操作中小心槍頭掛傷組織。 無(wú) 暫無(wú) 說(shuō)明文檔下載說(shuō)明書(shū).pdf 上一篇: 免疫組化(芯片)下一篇: 免疫熒光(單標) 推薦 OCT包埋 2024年9月4日 1247 暫無(wú) 查看全文 剛果紅染色 2024年12月4日 1246 服務(wù)介紹: 淀粉樣蛋白對剛果紅有選擇親和力,因此容易著(zhù)染。據認為剛果紅是一種分子為長(cháng)線(xiàn)狀的偶氮染料,其上的氨基容易和淀粉樣蛋白的... 查看全文 熒光掃描(雙標) 2024年9月6日 1119 【產(chǎn)品信息】 石蠟切片免疫熒光實(shí)驗報告 一、實(shí)驗器材及試劑 無(wú) 暫無(wú) 查看全文 激光共聚焦拍照 2024年9月5日 1732 主要應用: 一. 觀(guān)察細胞或組織內部微細結構。 二. 觀(guān)察組織中特異性蛋白的分布,表達。 三. 細胞、組織的3D成像。 四. 小... 查看全文
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